特別是
氨基液相色譜柱的填裝,需要有較高的技巧和熟練的技能。因此,有人甚至將“裝柱”看作是“藝術(shù)加技術(shù)”。但是,只要掌握了一些基本的規律和方法,任何實(shí)驗室都可以填裝出具有較高柱性能的色譜柱。當然,目前大多數實(shí)驗室多是購買(mǎi)商品預填裝柱來(lái)滿(mǎn)足分離、分析之需。但是在一些有特殊需要的情況下,或為節省經(jīng)費,在實(shí)驗室中自行填裝氨基液相色譜柱還是可取的。
氨基液相色譜柱的使用說(shuō)明:
1、液相色譜柱使用前注意事項:
液相色譜柱的儲存液無(wú)特殊說(shuō)明,均為評價(jià)報告所示的流動(dòng)相。在使用前,一定要注意液相色譜柱的儲存液與要分析樣品的流動(dòng)相是否互溶。在反相色譜中,如用高濃度的鹽或緩沖液作洗脫劑,應先用10%左右的低濃度的有機相洗脫劑過(guò)渡一下,否則緩沖液中的鹽在高濃度的有機相中很容易析出,堵塞色譜柱。
2、流動(dòng)相:
流動(dòng)相中所使用的各種有機溶劑要盡可能使用色譜純,配流動(dòng)相的水較好是超純水或全玻璃器皿的雙蒸水。如果將所配得流動(dòng)相再經(jīng)過(guò)0.45μm的濾膜過(guò)濾一次則更好,尤其是含鹽的流動(dòng)相。另外,裝流動(dòng)相的容器和色譜系統中的在線(xiàn)過(guò)濾器等裝置應該定期清洗或更換。
以常規硅膠為基質(zhì)的鍵合相填料通常的pH值適用范圍。當必須要在pH值適用范圍的邊界條件下使用色譜柱時(shí),每次使用結束后立即用適合于色譜柱儲存并與所使用的流動(dòng)相互溶的溶劑清洗,并*置換掉原來(lái)所使用的流動(dòng)相。
3、樣品:
樣品也要盡可能清潔,可選用樣品過(guò)濾器或樣品預處理柱對樣品進(jìn)行預處理;若樣品不便處理,要使用保護柱。在用正相色譜法分析樣品時(shí),所有的溶劑和樣品應嚴格脫水。