氨基液相色譜柱用于快速分離混合極性樣品,與C8或C18柱相比,疏水性較小,通??墒褂盟喑煞指叩南疵撘?。對非極性化合物表現了更短的保留時(shí)間,對極性化合物幾乎沒(méi)有明顯影響。它是以液體作為流動(dòng)相的一種色譜分析法,它亦是根據不同組分在流動(dòng)相和固定相之間的分配系數的差異來(lái)對混合物進(jìn)行分離的。氣相色譜中評價(jià)色譜柱柱效的方法及計算理論塔板數的公式同樣適合于高效液相色譜。
液相色譜系統主要由貯液瓶、泵、進(jìn)樣器、柱子、柱溫箱、檢測器、數據處理系統組成。對于整個(gè)系統而言,柱子、泵和檢測器是核心部件同時(shí)也是易出問(wèn)題的主要部位。
氨基液相色譜柱的使用說(shuō)明:
1、使用前注意事項:
儲存液無(wú)特殊說(shuō)明,均為評價(jià)報告所示的流動(dòng)相。在使用前,一定要注意儲存液與要分析樣品的流動(dòng)相是否互溶。在反相色譜中,如用高濃度的鹽或緩沖液作洗脫劑,應先用10%左右的低濃度的有機相洗脫劑過(guò)渡一下,否則緩沖液中的鹽在高濃度的有機相中很容易析出,堵塞色譜柱。
2、流動(dòng)相:
流動(dòng)相中所使用的各種有機溶劑要盡可能使用色譜純,配流動(dòng)相的水較好是超純水或全玻璃器皿的雙蒸水。如果將所配得流動(dòng)相再經(jīng)過(guò)0.45μm的濾膜過(guò)濾一次則更好,尤其是含鹽的流動(dòng)相。另外,裝流動(dòng)相的容器和色譜系統中的在線(xiàn)過(guò)濾器等裝置應該定期清洗或更換。
以常規硅膠為基質(zhì)的鍵合相填料通常的pH值適用范圍。當必須要在pH值適用范圍的邊界條件下使用色譜柱時(shí),每次使用結束后立即用適合于色譜柱儲存并與所使用的流動(dòng)相互溶的溶劑清洗,并*置換掉原來(lái)所使用的流動(dòng)相。
3、樣品:
樣品也要盡可能清潔,可選用樣品過(guò)濾器或樣品預處理柱對樣品進(jìn)行預處理;若樣品不便處理,要使用保護柱。在用正相色譜法分析樣品時(shí),所有的溶劑和樣品應嚴格脫水。