賽默飛經(jīng)典型HPLC分析柱管內填有顆粒大小均勻的固定相,一般商品化離子色譜分析柱填料主要用5~15μm顆粒的高分子聚合物小球,特定場(chǎng)合下也采用無(wú)機氧化物(如硅膠)顆粒,目前所用填料的顆粒主要為球形,而針對填料表面結構性質(zhì)(孔隙的大小),填料可以分離微孔型、大孔型和超孔型,隨著(zhù)離子色譜應用于復雜樣品越來(lái)越多,對交換容量要求也越來(lái)越高,超孔型填料也是離子色譜的一個(gè)發(fā)展趨勢。
賽默飛經(jīng)典型HPLC分析柱工作流程:高壓輸液泵將流動(dòng)相以穩定的流速(或壓力)輸送至分析體系,在色譜柱之前通過(guò)進(jìn)樣器將樣品導入,流動(dòng)相將樣品帶入色譜柱,在色譜柱中各組分被分離,并依次隨流動(dòng)相流至檢測器。抑制型離子色譜則在電導檢測器之前增加一個(gè)抑制系統,即用另一個(gè)高壓輸液泵將再生液輸送到抑制器。在抑制器中,流動(dòng)相背景電導被降低,然后將流動(dòng)出物導入電導池,檢測到的信號送至數據處理系統記錄、處理或保存。非抑制型離子色譜儀不用抑制器和輸送再生液的高壓泵,因此結構相對比較簡(jiǎn)單,價(jià)格也相對比較便宜。
賽默飛經(jīng)典型HPLC分析柱操作過(guò)程中需要注意事項:
1、首先應確認柱和儀器的接頭以及管路是否匹配。為減少死體積,進(jìn)樣閥、柱子、檢測器之間的連接管路內徑盡可能使用內徑較小的管線(xiàn),同時(shí)控制進(jìn)樣器、色譜柱和檢測器之間連接管線(xiàn)的長(cháng)度。安裝色譜柱之前,確認流路系統中的溶劑是否正常。對分析較復雜的樣品建議安裝保護柱。
2、為了使色譜柱與儀器系統達醉佳的連接效果,應盡量使用與色譜柱接口相匹配的螺帽和錐形接頭,如原來(lái)的接頭長(cháng)期匹配其他類(lèi)型的色譜柱,建議在連接新色譜柱前應檢查匹配情況,避免造成色譜柱的損壞或因色譜柱不匹配造成的漏液。
3、使用PEEK材料的通用接頭,只需用手擰緊不需要特定扳手,使用壓力為5000psi;使用溫度不得超過(guò)100℃。